DNA 추출 중~! Column 방식의 원리!!^^

안녕하세요~!! 

샤봉입니다!!

너무 너무나 오랫만에 포스팅이네요!!

시국이 시국인지라... 본업이 너무 바빠서...늘 블로그 생각은 하지만...잠만...자네요...^^ 죄송합니다.!!!

이전에 제가 포스팅 했던 DNA 추출의 기본 원리라는 글인데요!!! 영혼에 흐름대로 썻는데... 꾸준히 읽어주셔서...늘 놀랍고!!! 감사합니다.

2020.01.31 - [NGS_Wet bench/DNA 추출] - DNA 추출의 기본 원리~!

DNA 추출의 원리는 핵안의 DNA를 Lysis 과정을 통해 밖으로 나오게 하고~!! 그 DNA 잡아내는 과정이 2종류로 나뉜다고 하였는데요!^^

오늘은 그 2종류 중 하나인~~!! Column 방식의 원리에 대해서 말씀드리려고 합니다!!

저도 화학식 뭐 이런거 자세히는 모르구요~!!!

하지만 이 사진 한장으로 설명이 됩니다.!!^^

Column을 사용하시거나 본 분들이라면 생김새는 다 아실껍니다!!!

Column 방식은 기본적으로 원심력을 이용하여, Column의 내용물이 Membrane 통과하여, 장착한 Collection tube로 여과되게 됩니다.!!^^

동그라미로 확대된 이미지에서 연두색 선은 Membrane 뜻합니다.! 더 자세한 말로는 Silica Membrane이라고 말해요!

그래서 연두색 선 위에 Si 는 Silica Membrane을 지칭합니다.

이전 포스팅에서 DNA는 고염 상태에서 결합된다고 하였는데요!!

아래 연두색 Si에 Na+ 나트륨 이온 즉 고염 상태에서 DNA가 결합되어 있는 것을 확인할 수있습니다.

DNA 추출과정에서 항상 Wash 단계가 존재하는데 이때 Wash용액들은 기본적으로 고염을 띄며, DNA 의외에 성분을 원심력으로 

통과시켜 불순물 제거하게 됩니다.!

불순물을 충분히 제거 하게 되면~!! 위에 연두색 선 처럼 염분이 없는 물을 넣어 DNA와의 결합을 떼어내고!

원심력에 의해 DNA 통과되어 Tube에 모이게 됩니다!!

딱! 진짜 저 사진하나만 이해하시면~!!!

Column 방식의 원리는 다 이해하게 됩니다!!^^

이 원리를 아시면 나중에 실제 검사 및 연구를 진행하실때 DNA관련 문제가 있을때 여러 원인을 합리적으로 추측하시는데

도움이 될꺼라 단언컨데 확신합니다!!^^

그럼 이 Column 방식으로 추출하는 이유는 무엇일까요????

제 생각에는 간편합니다!!^^

검사 설명서만 잘 숙지하고 있다면!! 초심자가 수행하기에도 Column 방식은 난이도가 낮습니다.

적은 수의 검체를 원심분리기만 있다면 짧은 시간내에 수행하기에 적합합니다.^^

검사자의 숙련도를 크게 요구하지도 않기에 대중적입니다~!!

단.! 컬럼이라는 물리적인 소모품이 부피를 차지하고 원심분리기가 혹 필요하기에

다량의 검체를 추출하는데는 부적합니다.

나중에~~ 제가 다량의 검체 DNA 추출하는 유명한 장비들에 대해 리뷰한번 하겠습니다!!^^

그리고 필드?? 현장?? 검사실에서 Column 방식을 DNA 추출 이외에도

Purify 라는 과정에도 많이 이용하게 됩니다.

DNA 추출 이후에~~ PCR 과정을 거치면 시약에 있는 여러 성분들을 제거하고 PCR 과정을 거친 DNA만 포집하기 위해 사용합니다.

원리는 다 똑같아요~!!! Lysis 과정만 없습니다!^^

두서없고 정신없이 쓴 글 읽어주셔서 감사합니다~!!

혹시 궁금하신 부분이 있다면 댓글로 문의 주시면...알면 ...답해드릴께요!!... ㅋㅋ

이상으로 긴글 읽어주셔서 감사합니다!^^